Expresión diferencial de genes candidatos de respuesta temprana a Fusarium circinatum en Pinus radiata.

Abstract

Pinus radiata, conocido también como pino de California o pino de Monterrey, se distribuye principalmente en zonas de clima mediterráneo, encontrándose sus principales plantaciones en España, Nueva Zelanda, Sudáfrica, Australia, y Chile. En Chile, las plantaciones de P. radiata poseen gran importancia dentro de la actividad forestal, alcanzando cerca de un 68% del total de las plantaciones forestales del país, presentando un rápido crecimiento y buena calidad de madera.. En el año 2001, fue detectado en Chile el hongo Fusarium circinatum, afectando plantas madres en viveros de la Región del Biobío, causando la enfermedad conocida como ―cancro resinoso del pino‖ (pitch canker). A la fecha sigue presente solo en viveros, sin afectar a plantaciones. A la fecha el patógeno continua causando pérdidas en viveros, sin constituir un problema aún en plantaciones. F. circinatum afecta a más de 60 especies del género Pinus, entre las cuales P. radiata es considerada una de las más susceptibles.. En plantaciones no existen sistemas de control adecuados para esta enfermedad, por lo que resulta importante conocer las características genéticas de P. radiata que podrían determinar su resistencia al patógeno. En la presente investigación se evaluaron los niveles de expresión de tres genes candidatos que pudieran estar asociados a la resistencia a F. circinatum. Estos correspondieron a los genes pr5, pcber y pst, cuyas funciones, previamente documentadas, estarían asociadas a la resistencia a ciertos patógenos. Fueron utilizadas plantas de P. radiata de 17 meses de 13 genotipos, las que fueron inoculadas utilizando el método de aspersión, seleccionándose un genotipo resistente y uno susceptible, basado en la longitud de lesión en tallos.. Se realizaron extracciones de ARN en ambos genotipos a los 0, 2, 5 y 9 días post inoculación, para luego evaluar los niveles de expresión utilizando la técnica de PCR en tiempo real. Los tres genes aumentaron significativamente su expresión después de la inoculación de las plantascon F. circinatum, alcanzando su máximo nivel de expresión a los 5 días post inoculación en todos los casos, tiempo en el cual se registró la mayor diferencia entre el genotipo resistente y el susceptible, teniendo el genotipo resistente niveles de expresión superiores. La secuencia de la región codificante del gen pst en P. radiata no ha sido descrita a la fecha, por lo cual en este trabajo fue secuenciada obteniéndose una vi secuencia de 754 pb, la cual presentó una alta identidad con secuencias del gen pst en otras pinaceas.