Efecto neutralizante de lipopolisacaridos (LPS) de extractos ricos en proantocianidinas obtenidas de cranberry (vaccinium macrocarpon) y estudio de sus fracciones con diferentes grados de polimerización

Abstract

Vaccinium macrocarpon es un fruto originario de Norteamérica el cual ha demostrado poseer diversas actividades biológicas de interés para la salud sobre todo en el ámbito de la inhibición de actividad bacteriana asociadas principalmente a su contenido de proantocianidinas (PACs). El presente trabajo tuvo como objetivo el evaluar la capacidad de PACs de cranberry de inhibir adhesión de lipopolisacáridos (LPS) e inhibir el crecimiento de Helicobacter pyori y Escherichia coli. Para evaluar el material que tenía el mayor contenido de PACs, la cantidad presente en distintas muestras de cranberry se cuantificó mediante el método del dimetilaminoacinamaldehido (DMAC). Así la pulpa demostró ser el material que poseía mayor contenido de PACs con 115 mg. De equivalentes de catequina/mL de muestra. Sin embargo, la extracción de PACs fue más fácil desde el jugo concentrado clarificado (libre de partículas). El jugo fue limpiado exitosamente de azúcares y material no fenólico mediante la adsorción a la resina macroporosa amberlite XAD-7. Posteriormente, dicho material fue fraccionado primero mediante cromatografía en gel Sephadez LH-20 y luego por HPLC de interacción hidrofílica (HILIC) en fase diol para obtener fracciones de distinto peso molecular. Tales fracciones fueron agrupadas en las de bajo peso molecular (LMW, material monomérico), peso molecular intermedio (oligómeros) y alto peso molecular (HMW, material polimérico). En todas ellas se evaluó su capacidad de inhibir la adhesión de LPS, siendo la fracción de alto peso molecular (HMW) la que mostró la mayor eficacia con una actividad concentración-dependiente. Adicionalmente, también se evaluó la actividad inhibitoria de la multiplicación de H. pylori. Se observó que la fracción oligomérica presentó mayor actividad bacteriostática a una concentración de 20.48 mg/mL. Finalmente, se realizaron ensayos de inhibición de formación de biopelículas de E. coli en donde el extracto de cranberry (no fraccionado) fue más eficaz que las fracciones agrupadas en diferentes pesos moleculares. Así, una concentración 625 ?g/mL del extracto total redujo la biopelícula hasta un 50%, aproximadamente.